东京热网站,德国老妇激情性xxxx,欧美性潮喷xxxxx免费视频看 ,熟女俱乐部五十路六十路av

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > ELISA檢測(cè)樣本類型的多種化
ELISA檢測(cè)樣本類型的多種化
更新時(shí)間:2018-03-16   點(diǎn)擊次數(shù):1216次

一般咱們可用于ELISA檢測(cè)的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或安排勻漿液等,不同類型的檢測(cè)樣本前期的處理辦法是不一樣的。正確的處理樣本是確保ELISA檢測(cè)的正確性和準(zhǔn)確性的*步,下面簡(jiǎn)略介紹一下不同類型的樣本的處理辦法。

1、  血清

血清是zui常用于ELISA檢測(cè)的一類樣本,處理也比較簡(jiǎn)略。

用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒素的試管或離心管搜集血液標(biāo)本,將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃一個(gè)晚上,使血清分出。(將試管或離心管歪斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的分出。)4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細(xì)搜集上清。主張將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,防止重復(fù)凍融。

采血過(guò)程中應(yīng)防止溶血,由于紅細(xì)胞裂解時(shí)會(huì)開(kāi)釋具有過(guò)氧化酶活性的物質(zhì),在以HRP為標(biāo)記的ELISA檢測(cè)中會(huì)有非特異性的顯色,而導(dǎo)致檢測(cè)的不準(zhǔn)確性。一起也應(yīng)防止細(xì)菌污染,由于菌體內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP然后導(dǎo)致檢測(cè)的假陽(yáng)性。

2、  血漿

用含抗凝劑的采血管或離心管搜集血液標(biāo)本,標(biāo)本搜集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,防止重復(fù)凍融。防止運(yùn)用溶血或高血脂的標(biāo)本。

常用的抗凝劑為EDTA、肝素鈉和枸櫞酸鈉等,檢測(cè)時(shí)還應(yīng)仔細(xì)閱讀試劑盒說(shuō)明書(shū),檢查試劑盒是否對(duì)抗凝劑有特殊要求。

3、  細(xì)胞培養(yǎng)上清

取細(xì)胞培養(yǎng)上清到離心管,1000×g離心20min,除掉細(xì)胞碎片及雜質(zhì),取上清,-20℃或-80℃保存,防止重復(fù)凍融。

4、  細(xì)胞裂解液

1)  吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,用胰酶消化細(xì)胞,加適量培養(yǎng)基將細(xì)胞從培養(yǎng)板上吹下來(lái)。懸浮細(xì)胞可省掉。

2)  搜集細(xì)胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預(yù)冷的PBS潤(rùn)洗3次。

3)  參加適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前參加蛋白酶按捺劑)重懸細(xì)胞。一般6孔板一個(gè)孔的細(xì)胞量需求150~250μL PBS重懸。

4)  將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫凍結(jié)樣品,重復(fù)凍融幾回,使細(xì)胞充沛裂解。也可將樣品進(jìn)行超聲破碎,以到達(dá)裂解的意圖。

5)  4℃ 10000×g 離心10min,除掉細(xì)胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,防止重復(fù)凍融。

5、安排勻漿液

1)  將安排樣本用PBS (0.01錨點(diǎn)錨點(diǎn)M, PH 7.4) 沖刷,洗去安排表面殘留的血液或雜質(zhì)。

2)  將安排塊稱重,記錄后剪碎,碎塊應(yīng)盡量小,便于勻漿得更充沛

3)  將安排按必定的份額參加預(yù)冷的PBS(臨用前參加蛋白酶按捺劑)勻漿,勻漿時(shí)置于冰上或冰浴中。(一般按安排分量:PBS體積=1:9的份額勻漿,例如1g的安排樣本對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求恰當(dāng)調(diào)整,檢測(cè)后核算樣品濃度時(shí)應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù))

4)  汲取勻漿液到離心管,4℃ 5000×g 離心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,防止重復(fù)凍融。

6、  尿液、唾液等其他液體生物樣本

1000×g離心20min,取上清即可檢測(cè)。

總的來(lái)說(shuō),由于ELISA只能檢測(cè)可溶性蛋白的含量,所以應(yīng)確保一切樣本均為弄清的液體,沉積或懸浮物都應(yīng)離心去除。

為了確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性,保存于-20℃或-80℃的樣本在1~6個(gè)月內(nèi)檢測(cè);4℃保存的樣本應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。別的,還應(yīng)確保樣本不含NaN3,由于NaN3會(huì)按捺HRP的活性,然后導(dǎo)致假陰性的成果。

上海晶抗生物工程有限公司

上海晶抗生物工程有限公司

地址:上海市金山工業(yè)區(qū)亭衛(wèi)公路6558號(hào)9幢2441室

版權(quán)所有:上海晶抗生物工程有限公司  備案號(hào):滬ICP備16026504號(hào)-5  總訪問(wèn)量:574601  站點(diǎn)地圖  技術(shù)支持:智慧城市網(wǎng)  管理登陸

亚洲日韩精品无码专区网址| 天堂资源中文最新版在线一区| 国产乱子伦农村叉叉叉| 夜夜爽夜夜叫夜夜高潮漏水| 欧美巨鞭大战丰满少妇| 国产一区二区三区小说| 国产99久久久国产精品免费| 少妇愉情理伦片高潮日本| 99久久久无码国产精品不卡| 亚洲av无码精品国产成人 | 局长含着娇妻的一对高耸| 少妇高潮无套内谢麻豆传| 国产特黄级aaaaa片免| 国产成A人亚洲精V品无码性色| 日本少妇裸体做爰高潮片| 国产成人一区二区三区免费视频| 宝贝胸罩脱了让我揉你的胸| 久久人妻av无码中文专区| 国产熟女乱子视频正在播放| 久久人妻内射无码一区三区| 亚洲av综合色区无码另类小说| 久久久久夜色精品国产明星| 青青草在线视频| 丰满少妇夜夜爽爽高潮水| 小雪被老汉各种姿势玩弄| 十七岁在线观看免费高清完整版| 高h小月被几个老头调教| 韩国理仑片色情在线观看| 女人野外做爰a片妓女| 无码无套少妇毛多18pxxxx| 美女网站色| 捆绑白丝粉色jk震动捧喷白浆| 亚精区在二线三线区别99| 最近韩国高清完整版播放电影| 丰满人妻被黑人猛烈进入| 国产又大又粗又硬又长a片小说| 好大好湿好硬顶到了好爽| 群体交乱之放荡娇妻| 99偷拍视频精品一区二区| 国产又色又爽又刺激在线观看 | 护士做爰乱高潮全过程小说|