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ELISA試劑盒的操作法,您做對了么?
更新時間:2020-01-14   點擊次數(shù):1150次

上海晶抗生物科技有限公司常年供應(yīng)ELISA試劑盒,為保證實驗的成功,運用ELISA試劑盒時一定要注意相關(guān)的事項,今日,我們首要介紹人白介素ELISA試劑盒操作步驟。

1. 確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。

2. 將倍比稀釋的規(guī)范品各0.1ml順次參加一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標(biāo)本按100ul每孔參加。

3. 酶標(biāo)板加上蓋,37℃反響90分鐘。

4. 反響后用自動洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。洗刷2次。

5. 將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml順次參加。37℃反響60分鐘。

6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗刷3次,每次浸泡1分鐘左右。

7. 將準(zhǔn)備好的ABC工作液按每孔0.1ml順次參加。37℃反響30分鐘。

8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗刷5次,每次浸泡1-2分鐘左右。

9. 按每孔0.1ml順次參加TMB顯色工作液,37℃避光反響,反響過程中,要常常的調(diào)查,當(dāng)肉眼可見規(guī)范品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔差別不明顯時,即可參加TMB終止液0.1ml/孔。(顯色反響長不要超越30分鐘)。

10. 用酶標(biāo)儀在450nm測定O.D.值。

11. 依據(jù)樣品的吸光值在坐標(biāo)上找出對應(yīng)的濃度。用戶也能夠運用各種應(yīng)用軟件來核算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍,其實際濃度應(yīng)該×N。

上海晶抗生物工程有限公司

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