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今日解說:ELISA試劑盒準(zhǔn)確度及精密度
更新時(shí)間:2020-03-25   點(diǎn)擊次數(shù):1091次

ELISA試劑盒您經(jīng)常會(huì)聽見它的好,但具體好在哪兒,您也不所得之!

一、ELISA試劑盒的準(zhǔn)確度

通常以回收率、定值血清的靶值范圍、對(duì)照試驗(yàn)及干擾試驗(yàn)的結(jié)果來分析判斷:

1. 回收試驗(yàn) 回收率越接近100%,準(zhǔn)確率越高,一般以100%±5%為合格。

2. 定值血清的測(cè)定 對(duì)于某些無法準(zhǔn)確加入標(biāo)準(zhǔn)物的試劑盒,可用低、中、高濃度的定值血清進(jìn)行測(cè)定,測(cè)得值符合定值血清的靶值范圍(±2S)為合格。

3. 對(duì)照試驗(yàn) 將被檢試劑盒與*的參考方法同時(shí)測(cè)定若干樣本(一般要求100份,zui少需30份),計(jì)算兩組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)和直線回歸方程。

4. 非特異性與干擾試驗(yàn) 對(duì)維生素C、黃疸、溶血、乳糜等因素的耐受程度,干擾值越小越好。

二、ELISA試劑盒精密度

試劑的瓶間差異、批內(nèi)精密度和批間差異三組測(cè)定的平均值之間應(yīng)無顯著差異,否則,試劑盒的均一性不符合要求:

1. 瓶間差異:同一試劑盒,取10瓶試劑復(fù)溶,測(cè)定同一樣品的含量,求平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)。

2. 批內(nèi)精密度:同一樣品用同一瓶試劑測(cè)定10次,求平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)

3. 批間差異:同一樣品,用不同批號(hào)的10瓶試劑測(cè)定,求平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)

三、線性范圍

指該ELISA試劑盒按其說明使用時(shí)可準(zhǔn)確測(cè)量的范圍。被檢樣品的含量超出測(cè)定線性范圍,必須改變樣品與試劑體積的比例,重新測(cè)定才能得到準(zhǔn)確結(jié)果。試劑盒的測(cè)定線性范圍是衡量試劑盒質(zhì)量的一個(gè)指標(biāo),也是正確使用該試劑盒的關(guān)鍵之一。

四、抗干擾作用:雙試劑型試劑盒主要優(yōu)點(diǎn)是抗干擾作用。

五、靈敏度:在終點(diǎn)法靈敏度以特定波長下1cm光徑時(shí)單位濃度的吸光度值表示。

六、穩(wěn)定性

· 原包裝試劑的穩(wěn)定性;

· 復(fù)溶后試劑的穩(wěn)定性;

· 不同溫度下的保存期。

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