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我司回答:關(guān)于怎么完善ELISA試劑盒試驗中的過錯?
更新時間:2020-08-11   點擊次數(shù):1178次

ELISA試劑盒試驗操作過程多,新手操作難免會有過錯。而這些過錯許多是由細節(jié)不夠好形成的,削減過錯的方法有許多,比方做試驗時少說話,防止唾液掉進酶標(biāo)條中。當(dāng)然,大家還要學(xué)會自己發(fā)掘問題,找出原因。那么咱們要怎么完善elisa試劑盒試驗中的過錯? 

    
①:評估試劑的實用性,試劑的安穩(wěn)與否,對精確率的凹凸到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進行陰、陽對照及樣品重復(fù)對比試驗,判定試劑符合要求后方可運用。
       
②:操作前仔細閱讀說明書,嚴(yán)厲依照說明書要求進行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不行混用。值得改善的地方,重復(fù)試驗確認建立后才能改善,比方洗板次數(shù)的把握等。
       
③:加樣要精確、快速。加樣不精確,酶生成物的量不能確認,直接影響顯色成果。別的,顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。要求在必定時刻內(nèi)加樣結(jié)束的試驗,如果加樣緩慢,便出現(xiàn)差錯,并且試劑長期露出在外,尤其室溫過高時,保存期會縮短乃至失效。
      
④:檢驗技師應(yīng)具備從事試驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能嫻熟操作試驗儀器、器械,具有必定總結(jié)和剖析問題的才能,對試驗中出現(xiàn)的意外狀況能及時妥善解決。
      
⑤:運用校對過的微量移液器,排除天然差錯。移液器精確與否對定量檢測尤為重要。
      
⑥:嚴(yán)厲把握顯色時刻,顯色時刻過短,加入終止液反應(yīng)終止后,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。超越顯色要求時刻后顯色,應(yīng)判為假陽性,這或許與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后當(dāng)即顯色,不行報陽性,這或許是本底顯色的成果。
      
⑦:洗刷*,洗板不*,酶結(jié)合物本底顯色會出現(xiàn)假陽性。別的,洗刷液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗刷液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也或許出現(xiàn)假陽性。
      
⑧:ELISA試劑盒嚴(yán)控反應(yīng)時刻。反應(yīng)時刻過長,酶失活;反應(yīng)時刻過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,容易洗掉,都或許形成假陰性。

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