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ELISA試劑盒實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中牛肺炎支原體抗原(MPAg)水平。用純化的牛肺炎支原體(MP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入肺炎支原體抗原(MPAg)，再與HRP標(biāo)記的肺炎支原體(MP)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的。顏色的深淺和樣品中的肺炎支原體抗原(MPAg)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中牛肺炎支原體抗原(MPAg)濃度。

ELISA試劑盒注意事項

1. 由于底物顯色劑對光及其敏感，因此要避光保存。

2. 檢測吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開，將其預(yù)熱30min以上。

3. 孵育的時間應(yīng)該嚴(yán)格按照試劑盒說明書上的時間為準(zhǔn)。

4. 要盡量做雙孔實驗，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，又能反映出試劑盒的精密度。

5. 對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。

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