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上海晶抗生物教您如何正確選擇試劑盒
更新時間:2023-04-11   點擊次數(shù):937次

要問科研怕遇到的糟心事,非買到科研試劑莫屬了,用試劑無非導致兩種結(jié)果:實驗失敗or被動學術(shù)造假。ELISA試劑盒門檻較低,制假相對簡單,常有不法商家打著種屬全、指標全、現(xiàn)貨供應的旗號來生產(chǎn)、銷售ELISA試劑盒,曾有老師吐槽“每個月都能收到好幾個從未聽過的廠商向我展示ELISA試劑盒"。針對ELISA試劑盒真假問題,我們整理了一些辨別經(jīng)驗(購買前and購買后),希望對大家有所幫助!

購 買 前:

1.選擇正規(guī)公司

國產(chǎn)試劑盒一定要選擇大型正規(guī)企業(yè),比如晶抗生物。將“廠家名"、“ELISA試劑等關(guān)鍵詞在網(wǎng)上搜索,有的網(wǎng)站或論壇如丁香園等會有打假曝光平臺。正規(guī)廠商的ELISA試劑盒通常有技術(shù)發(fā)明支撐和ISO9001國際質(zhì)量體系認證,且廠家會定期收集整理試劑盒的文獻引用情況,購買前可向廠家索要相關(guān)材料加以核實。

2.試劑盒性能參數(shù)

向廠家索要或從其下載產(chǎn)品說明書和質(zhì)控報告,查找ELISA試劑盒的關(guān)鍵質(zhì)控性能參數(shù):準確度(加標回收率、稀釋線性)、精密度(板內(nèi)差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準。如果無法提供這些性能參數(shù)數(shù)據(jù),則說明試劑盒開發(fā)過程不夠科學嚴謹,并未做試劑盒性能測試從而無法得到準確真實的結(jié)果,也有極大可能是假貨試劑盒。

3. 不常見指標的選擇

如需檢測不常見物種的樣本(如禽類、豬、羊等),可選擇靠譜的生物網(wǎng)站或ELISA試劑盒供應商。其實,“貨比三家"有時會有一些“驚喜",也許你會發(fā)現(xiàn):某個公司的說明書除了指標名稱不一致,其他內(nèi)容基本一樣;某個指標,幾家公司試劑盒的性能參數(shù)一樣…一定要記?。宏P(guān)于網(wǎng)上宣傳有所有種屬所有指標ELISA試劑盒的公司,那真的是再謹慎也不為過。

4. 所有指標常備現(xiàn)貨

抗體并不十分穩(wěn)定,針對非熱門研究指標,廠家為保證產(chǎn)品質(zhì)量通常不會長期備現(xiàn)貨,若承諾相對冷門的ELISA試劑盒能隨時發(fā)貨,那需謹慎考慮是否要選擇該供應商。

購 買 后:

1.檢查

檢查說明書、包裝盒的質(zhì)量,通常偽劣產(chǎn)品為了降低成本,印刷的質(zhì)量會比較差。其次仔細閱讀說明書,如上所示查找ELISA的性能指標。

2.實驗

① 利用干擾實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原

a. 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液;

b. 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體;

c. 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物;

d. 實驗完畢后,檢測其標準曲線,如果標準曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為假貨ELISA試劑盒;

e. 如果標準曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。

② 如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否造假

a. 取出購買的試劑盒A的包被板兩條;

b. 一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線;

c. 另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線;

d. 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物;

e. 實驗完畢后,檢測兩條標準曲線,如果兩條標準曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標而非A和B,無則反之。

f. 如果兩條標準曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標,試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。


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