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技術(shù)原理：

1、抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。

2、結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。

3、 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。

4、 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。

5、此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。

6、加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。

試劑盒小貼士

1. 在收到試劑盒后，為保證檢測效果，需要根據(jù)說明書中保存條件正確儲存。除非特別注明，試劑盒大多是在2～8°C條件下儲存

2. 在實驗進行前，請確認(rèn)包裝中的試劑盒成分與說明書一致，再進行后續(xù)操作

3. 溶解標(biāo)準(zhǔn)品過程中，注意標(biāo)準(zhǔn)品是否受潮，過程中要避免產(chǎn)生泡沫

4. 為了避免交叉污染，配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽

5. 每次孵育時，正確使用封板膠紙可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性

6. 正確洗板有助于實驗結(jié)果的穩(wěn)定性

7. TMB顯色底物在上板前應(yīng)為無色，請避光保存。加入孔板后，將由無色變成不同程度的藍色

8. 終止液上板順序需與底物上板順序一致，加入終止液，溶液顏色由藍色變?yōu)?。如果出現(xiàn)綠色，即表明終止液與底物未混勻，請充分混合

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