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晶抗生物人C1qelisa試劑盒操作步驟
更新時(shí)間:2025-03-10   點(diǎn)擊次數(shù):203次

晶抗生物人C1qelisa試劑盒操作步驟

人C1qelisa試劑盒

操作步驟:

1、使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。

2、根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔

的盡量做復(fù)孔。

3、加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37C溫育

45分鐘。

4、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

5、每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37°C溫育30分鐘。

6、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

7、每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37°C溫育5分鐘。避免光照。

8、取出酶標(biāo)板,迅速加入50u終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

9、在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

操作注意事項(xiàng):

1、試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

2、實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

3、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。

5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6、底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

7、加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

一般來(lái)講,96T能檢測(cè)90個(gè)樣本,48T能檢測(cè)42個(gè)樣本,這里面需要用標(biāo)樣來(lái)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,所以各位需要做實(shí)驗(yàn)的老師們,請(qǐng)?jiān)谫?gòu)買ELISA試劑盒的時(shí)候注意,需要做多少個(gè)樣本,在決定買多大規(guī)格的試劑盒,以免做實(shí)驗(yàn)時(shí)出現(xiàn)試劑盒不夠用或者浪費(fèi)!

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