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ELISA試劑盒各種樣本的處理方法
更新時(shí)間:2016-12-01   點(diǎn)擊次數(shù):1522次

ELISA試劑盒準(zhǔn)確的處理樣本是確保ELISA查看的準(zhǔn)確性和準(zhǔn)確性的*步,下面就簡(jiǎn)略介紹一下不一樣類(lèi)型的樣本的處理辦法。
血清
血清是zui常用于ELISA查看的一類(lèi)樣本,處理也比較簡(jiǎn)略。
將上清分裝多份,-20℃或-80℃保留,防止重復(fù)凍融。防止運(yùn)用溶血或高血脂的標(biāo)本。
常用的抗凝劑為EDTA、肝素鈉和枸櫞酸鈉等,查看時(shí)還應(yīng)細(xì)心閱讀試劑盒說(shuō)明書(shū),查看試劑盒是不是對(duì)抗凝劑有特殊要求。
用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒素的試管或離心管收集血液標(biāo)本,將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃放置一晚,使血清分出。
4℃ 1000×g離心20分鐘,細(xì)心收集上清。
一起也應(yīng)防止細(xì)菌污染,由于菌體內(nèi)可能富含內(nèi)源性的HRP然后致使查看的假陽(yáng)性。
一般咱們可用于ELISA查看的樣本是有多種類(lèi)型的,如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等,不一樣類(lèi)型的查看樣本前期的處理辦法是不一樣的。
ELISA試劑盒血漿
用含抗凝劑的采血管或離心管收集血液標(biāo)本,標(biāo)本收集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。
為了確保查看的準(zhǔn)確性,保留于-20℃或-80℃的樣本在1~6個(gè)月內(nèi)查看;
4℃保留的樣本應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行查看。別的,還應(yīng)確保樣本不含NaN3,由于NaN3會(huì)抑制HRP的活性,然后致使假陰性的成果。
細(xì)胞培養(yǎng)上清
取細(xì)胞培養(yǎng)上清到離心管,1000×g離心20min,除掉細(xì)胞碎片及雜質(zhì),取上清,-20℃或-80℃保留,防止重復(fù)凍融。
尿液、唾液等別的液體生物樣本
1000×g離心20min,取上清即可查看。
ELISA試驗(yàn)成功的條件是樣本的準(zhǔn)確處理加上試驗(yàn)途中準(zhǔn)確的操作,準(zhǔn)確的處理樣本是確保ELISA查看的準(zhǔn)確性和準(zhǔn)確性的*步。
總的來(lái)說(shuō),由于ELISA只能查看可溶性蛋白的含量,所以應(yīng)確保一切樣本均為弄清的液體,沉積或懸浮物都應(yīng)離心去掉。
建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保留,防止重復(fù)凍融。
ELISA試劑盒采血過(guò)程中應(yīng)防止溶血,由于紅細(xì)胞裂解時(shí)會(huì)開(kāi)釋具有過(guò)氧化酶活性的物質(zhì),在以HRP為標(biāo)記的ELISA查看中會(huì)有非特異性的顯色,而致使查看的不準(zhǔn)確性。

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